I risultati si possono ottenere dopo 16 ore di incubazione a 37°C. È possibile anche ridurre il tempo di incubazione di un’ora (15 ore), ma tempi di incubazione inferiori diminuiscono la sensibilità del test N-Light™ E. coli per le cellule stressate. Nel caso in cui si preveda un numero relativamente elevato di E. coli, il tempo di incubazione può essere ridotto a 8 h. Allo stesso modo, un tempo di incubazione fino a sei ore più lungo (30 h) non influisce sul test, ma tempi di incubazione più lunghi non sono ancora stati convalidati e potrebbero portare a risultati inaffidabili.